选修 3 1 .先导编辑技术是利用经过改造的 Cas9 蛋白,在基因组中的特定位点切断 DNA ,随后逆转录酶在 RNA 链的引导下在切断处进行基因编辑,其能实现更精准地对 DNA 进行编辑,该过程流程如图所示。该技术可以实现基因的定点突变和整合,将修饰好的基因导入胚胎干细胞,治疗人类某些单基因遗传病。 ( 1 )基因重组技术工具中的 _______ 酶与先导编辑工具中 Cas9 蛋白作用相似,但二者的不同之处是前者 ____________________________________________________________ 。 ( 2 )下图为由经过修饰的 pku 基因构建的重组载体,在转化胚胎干细胞时,只有重组载体中整合区域正确整合到胚胎干细胞染色体 DNA 上才表示转化成功,而重组载体的其他区域将被靶向分解。在转化中会出现错误整合,整合错误才会出现重组载体中的两个 HSV-tk 中至少会有一个与 neo r 一起整合到染色体 DNA 上而不被分解。已知含有标记基因 neo r 的细胞具有 G418 的抗性。 HSV-tkl 、 HSV-tk2 的产物都能把 DHPG 转化成有毒物质而使细胞死亡。 1 题干中的胚胎干细胞可以来自 _____________________________ ,利用胚胎干细胞为受体细胞是因为其功能上具有 ________________________ 。 2 胚胎干细胞在体外培养时需要满足的条件除一定的气体环境、充足营养、适宜的温度和 PH 外,还应保证 ____________ 条件,气体环境中的 CO 2 的作用是 _____________________ 。 3 转化后的各类胚胎干细胞要依次在含有 G418 和 ____________________ 的培养液中培养,在双重选择下存活并增值的是正确整合的胚胎干细胞,原因是 ________________________________________ 。