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当蛋白与DNA结合时,导致DNA弯曲以适合与蛋白表面的化学基团发生作用,这种由蛋白诱导的DNA弯曲可以通过DNA蛋白总物在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率变化检测到,弯曲DNA的迁移率依赖于在溶液中其回转时两个末端的平均距离。DNA弯曲得越厉害,两个末端间的平均距离越小,迁移就越慢,如果在DNA上有两个扭曲的位点,则端到端的距离决定于两个扭曲是同向或是反向(如图13-3-36A)。 已知,CAP与其调控位点的DNA结合时,使DNA产生了近90°的弯曲,你想知道弯曲处的结构细节,例如,CAP结合位点中心的DNA弯曲导致DNA螺旋的小沟在内侧,还是相反,大沟在内侧。为了回答这个问题,准备两种构件(图13-3-36B所示),在第一个构件中,两侧是CAP结合序列,中央区域可插入长度10~20bp的DNA系列中的一个片段。另一个构件中,一边是CAP结合区,另一边是一个(A 5 N 5 ) 4 序列。已知这个结构弯曲时,大沟在内侧,现在检测构件及没有插入的相关DNA的迁移率,以相关的迁移率对弯曲中心之间的核苷酸作图(如图13-3-36D),由于CAP结合,使DNA弯曲。