(多选)通过设计引物,运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是
A.
引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入
B.
在PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸、解旋酶、Taq酶等
C.
第3轮PCR,引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因
D.
第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/2