假如你要用原核表达载体pET28a质粒表达一个蛋白,该蛋白的基因CDS如下: >ORF ATGAACGCTACACACTGCATCTTGGCTTTGCAGCTCTTCCTCATGGCTGTTTCTGGCTGTTACTGCCACG TGTTGCCGGAATTCAGCCTCAGGAAGCGGAAAAGGAGTCGCTGCTGA 酶切位点分析可以用DNAMAN,或在线网址:http://nc2.neb.com/NEBcutter2/index.php 通过在PCR引物5’ 端加入酶切位点,扩增该片段后,PCR产物经双酶切接入pET28a载体的BamHI到XhoI之间的多克隆位点(MCS)区,载体MCS区序列如下: 在设计PCR引物时,如果下游引物5’ 端加入的酶切位点是XhoI,上游引物5’ 端可以加入酶切位点有( )